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摘要:
目的 构建与宫颈癌组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因G719S和T790M位点突变型重组载体,利用其建立分子开关平台检测宫颈癌EGFR基因突变.方法 以野生型重组质粒为模板,利用重叠PCR技术,得到突变型融合目的DNA片段,再将此目的片段连接入pMD19-T质粒中,构建成突变型重组载体,将其转化入大肠埃希菌E.coli DH5α感受态细胞进行表达,用菌液PCR和基因组测序进行鉴定.设计特异性检测引物,建立分子开关检测平台用于临床宫颈癌样本的检测.结果 通过基因组测序证实G719S和T790M突变位点成功引入,定点突变载体构建成功.成功建立了分子开关检测平台用于宫颈癌组织DNA的检测.结论 利用重叠PCR技术简便、高效地构建了EGFR基因突变重组载体,并建立了分子开关检测平台,为基因定点突变及临床上检测EGFR基因突变提供了新的技术手段.
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文献信息
篇名 EGFR基因G719 S和T790 M突变载体的构建及临床应用研究
来源期刊 临床检验杂志 学科 医学
关键词 宫颈癌 表皮生长因子受体基因 定点突变 重叠PCR
年,卷(期) 2018,(5) 所属期刊栏目 研究生园地
研究方向 页码范围 380-383
页数 4页 分类号 R711.74
字数 语种 中文
DOI 10.13602/j.cnki.jcls.2018.05.16
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 彭华 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 13 37 4.0 6.0
2 周晶 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 7 9 2.0 3.0
3 向花花 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 1 0 0.0 0.0
4 肖正午 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 1 0 0.0 0.0
5 张宏全 南华大学药物药理研究所湖南省分子靶标新药研究协同创新中心 2 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
宫颈癌
表皮生长因子受体基因
定点突变
重叠PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床检验杂志
月刊
1001-764X
32-1204/R
大16开
南京市中央路42号
28-104
1983
chi
出版文献量(篇)
5950
总下载数(次)
22
总被引数(次)
39539
相关基金
湖南省自然科学基金
英文译名:Natural Science Foundation of Hunan Province
官方网址:http://jj.hnst.gov.cn/
项目类型:一般面上项目
学科类型:
论文1v1指导