玉米磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及其表达载体构建

• 作者: 周岩 曹路遥 田瑞婷 蔺一帆 陈亚东 陈燕绘 魏琦超
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因 基因克隆 载体构建 拟南芥 遗传转化
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 作物栽培·遗传育种
• 页码范围: 16-23
• 页数: 8页
• 分类号: S513
• 字数: 6293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2018.05.004

摘要

为了克隆磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)的编码基因以用于表达载体的构建,本研究根据已公开的序列信息设计特异性引物,以玉米自交系ZD410的叶片DNA为模板,通过PCR技术成功克隆了pepc基因的全长序列.生物信息学分析发现,该基因完整ORF长度为2 913 bp,编码蛋白质分子质量约为108.179 ku,等电点(PI)为5.73;对其氨基酸序列进行同源性检索分析显示,该蛋白质与其他C4植物的PEPC蛋白具有极高的同源性;利用Gateway技术构建含pepc目的基因的表达载体,并通过农杆菌介导的花序浸染法将该基因导入野生型拟南芥.