生鲜乳中布鲁氏杆菌多重PCR检测方法的建立

• 作者: 冯小慧 史培 姚一萍 宋洁 张三粉 杜琳 王丽芳 申捷
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏杆菌 基因组 多重PCR 快速检测 生鲜乳
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 实验室检测
• 页码范围: 211-213,218
• 页数: 4页
• 分类号: S851.34+7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.05.0296

摘要

为了建立快速、准确检测生鲜乳中布鲁氏杆菌的方法,试验采用细菌基因组提取试剂盒提取生鲜乳中的布鲁氏杆菌基因组DNA,针对布鲁氏杆菌保守抗原Omp31、Omp25设计引物,并设计细菌16S rDNA基因序列作为内参引物,通过引物浓度和退火温度的调整优化,建立了生鲜乳中布鲁氏杆菌的多重PCR检测方法.结果表明:建立的多重PCR检测结果与预期结果一致,可以扩增出布鲁氏杆菌Omp31(472 bp)、Omp25(140 bp)特异性片段以及细菌16S rDNA的通用片段.而对于其他致病菌只能扩增出1 500 bp的细菌16S rDNA通用片段,具有较强的特异性.该多重PCR检测方法灵敏度可达1×105 cfu/mL,较单一PCR检测方法灵敏度有所下降.说明本试验建立的检测方法可完成生鲜乳中布鲁氏杆菌的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽芳		57	211	8.0	11.0
2	史培		7	9	2.0	3.0
3	冯小慧		10	68	5.0	8.0
4	张三粉		8	21	2.0	4.0
5	姚一萍		15	181	6.0	13.0
6	杜琳		6	35	3.0	5.0
7	宋洁		8	10	1.0	3.0
8	申捷		1	0	0.0	0.0