shRNA沉默NSD2基因表达对OCI-Ly3细胞增殖、凋亡及Akt/mTOR信号通路的影响

• 作者: 林璐慧 邹勇 郭孟贤 马旭东 黄轶群
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: shRNA NSD2基因 H3 K36me2 人弥漫大B细胞淋巴瘤 OCI-Ly3细胞 Akt/mTOR信号通路
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 淋巴瘤基础与临床
• 页码范围: 772-778
• 页数: 7页
• 分类号: R733.1
• 字数: 3776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7534/j.issn.1009-2137.2018.03.023

摘要

目的:探讨干扰shRNA下调NSD2基因表达对弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-Ly3细胞增殖、凋亡及Akt/mTOR信号通路的影响.方法:NSD2 shRNA慢病毒转染OCI-Ly3细胞,应用real time Q-PCR检测NSD2mRNA的表达和Western blot法检测NSD2蛋白的表达,以鉴定NSD2 shRNA的沉默效果,应用CCK-8试验检测细胞增殖,AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot测定组蛋白H3K36二甲基化水平(H3 K36me2)、BAX BCL-2、caspase-3、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR (p-mTOR)、磷酸化P70核糖体蛋白S6激酶(phos-phorylation P70 ribosomal protein S6 kinase,p-P70S6K)的变化.结果:NSD2 shRNA慢病毒转染OCI-Ly3细胞72 h后,real time Q-PCR和Western blot检测显示NSD2的mRNA和蛋白表达均有明显下降(P＜0.05),NSD2 shRNA组细胞增殖率明显低于对照和Neg shRNA组(P＜0.05),NSD2 shRNA组细胞的凋亡率明显高于对照组和和NegshRNA组(30.37±4.22)％vs(1.36±0.52)％和(2.17±1.43)％(P ＜0.05);促凋亡蛋白BAX表达上调,抑制凋亡蛋白BCL-2表达下调,caspase-3表达上调;H3 K36me2水平较对照组明显下降,而检测Akt/mTOR通路蛋白发现,Akt总蛋白水平未明显下降,但是活性形式的磷酸化p-Akt、p-mTOR和p-P70S6K表达下调.结论:干扰沉默NSD2基因可抑制弥漫大B细胞淋巴瘤OCI-Ly3细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是调节组蛋白H3 K36 me2水平变化,特异性地抑制Akt/mTOR信号通路的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄轶群	福建医科大学附属漳州市医院血液内科	47	211	6.0	11.0
2	马旭东	福建医科大学附属漳州市医院血液内科	54	210	7.0	11.0
3	邹勇	福建医科大学附属漳州市医院血液内科	7	33	3.0	5.0
4	郭孟贤	福建医科大学附属漳州市医院血液内科	6	8	2.0	2.0
5	林璐慧	福建医科大学附属漳州市医院血液内科	3	4	1.0	1.0