基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取       
摘要:
目的:获得能应用于治疗铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)感染的抗PcrV蛋白全人源单克隆抗体.方法:以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板,PCR 扩增 PcrV 基因并构建重组表达载体 pET-28a-PcrV,转化至大肠杆菌 BL21 (DE3),利用IPTG诱导表达,并通过镍离子螯合树脂亲和纯化PcrV蛋白.利用噬菌体抗体库筛选PcrV结合的噬菌体克隆并进行序列测定,以测序正确的阳性克隆质粒为模板,PCR扩增该抗体的重链可变区基因和轻链可变区基因并构建重组表达载体转染至293E细胞,收取培养细胞上清,并利用Protein A树脂亲和纯化抗体.利用ELISA实验检测抗体亲和力,并通过小鼠铜绿假单胞菌感染肺炎模型验证抗体活性.结果:获得重组蛋白PcrV,通过噬菌体展示技术筛选并制备了一株全人源抗PcrV单克隆抗体YG5.ELISA实验结果表明YG5抗体具有较高的亲和力(EC50=61 ng/ml),进一步的实验结果表明,YG5能有效抵抗铜绿假单胞菌感染,降低小鼠的死亡率.结论:靶向铜绿假单胞菌PcrV蛋白的全人源单克隆抗体YG5能够有效地抑制铜绿假单胞菌致病性,降低其对机体感染,有可能成为抗铜绿假单胞菌感染的治疗性抗体.
推荐文章
抗铜绿假单胞菌PcrV的scFv-Fc抗体的制备及体外活性研究
铜绿假单胞菌
PcrV
单克隆抗体
生物膜
黏附
侵入
鼠抗SARS病毒X4蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
严重急性呼吸综合征
SARS病毒
抗体
单克隆
抗IL-18单克隆抗体的标记
辣根过氧化物酶
单克隆抗体
IL-18
标记
抗哇巴因单克隆抗体的制备及初步鉴定
内源性哇巴因
单克隆抗体
杂交瘤
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数  
(/次)
(/年)
文献信息
篇名 抗铜绿假单胞菌PcrV蛋白单克隆抗体的筛选和功能验证
来源期刊 中国免疫学杂志 学科 医学
关键词 铜绿假单胞菌 PcrV蛋白 单克隆抗体 急性肺炎模型
年,卷(期) 2018,(2) 所属期刊栏目 免疫学技术与方法
研究方向 页码范围 233-238
页数 6页 分类号 R392.1
字数 5294字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-484X.2018.02.015
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 沈倍奋 213 1497 18.0 31.0
3 高亚萍 26 80 5.0 7.0
5 杨光 6 13 3.0 3.0
6 管章春 2 4 1.0 2.0
7 刘方杰 1 4 1.0 1.0
11 刘成华 2 4 1.0 2.0
传播情况
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献  (21)
共引文献  (1)
参考文献  (15)
节点文献
引证文献  (4)
同被引文献  (19)
二级引证文献  (1)
1997(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2000(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2001(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2002(2)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(0)
2004(2)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(0)
2006(1)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(0)
2007(3)
  • 参考文献(2)
  • 二级参考文献(1)
2008(1)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(1)
2010(2)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(1)
2011(3)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(2)
2012(3)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(2)
2014(6)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(5)
2015(4)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(4)
2016(6)
  • 参考文献(1)
  • 二级参考文献(5)
2018(0)
  • 参考文献(0)
  • 二级参考文献(0)
  • 引证文献(0)
  • 二级引证文献(0)
2019(5)
  • 引证文献(4)
  • 二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
铜绿假单胞菌
PcrV蛋白
单克隆抗体
急性肺炎模型
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国免疫学杂志
月刊
1000-484X
22-1126/R
大16开
长春市建政路971号
12-89
1985
chi
出版文献量(篇)
7702
总下载数(次)
13
总被引数(次)
40225
论文1v1指导