细毛羊皮肤毛囊miR-1298-5p的靶基因预测及验证

• 作者: 姜怀志 孙丽敏 张桂山 徐晶 白曼 项露杰
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 乾华肉用美利奴 羊皮肤毛囊 miR-1298-5p FGF2 双荧光素酶报告基因实验
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 79-82
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|S826.2
• 字数: 2851字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.2018-04-079

摘要

为探讨miR-1298-5p及其靶基因与细毛羊毛囊生长发育的关系,本实验以乾华肉用美利奴羊不同发育时期皮肤毛囊组织为材料,通过生物信息学方法预测miR-1298-5p的靶基因,采用RT-PCR和Western Blot对miR-1298-5p及其靶基因进行定量检测;扩增靶基因3'UTR区,构建野生型和突变型靶基因表达载体后与miR-1298-5p mimics共同转染到HEK293T/17细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-1298-Sp与靶基因的靶向关系.结果表明:FGF2基因3'UTR区含有miR-1298-5p结合位点,FGF2为miR-1298-5p潜在靶基因,通过核酸水平和蛋白水平定量表达规律发现miR-1298-5p与靶基因FGF2呈负相关,初步确定FGF2为miR-1298-5p的靶基因.双荧光素酶报告基因实验显示,miR-1298-Sp mimics能够抑制野生型FGF2的靶位点报告载体的荧光素酶活性;但当靶基因结合位点突变后,FGF2被抑制的荧光素酶活性能够得到恢复.综上,miR-1298-5p与FGF2有靶向关系,miR-1298-5p能通过负调控FGF2的表达调控羊毛囊发育.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂山	吉林农业大学动物科学技术学院	20	46	4.0	5.0
2	姜怀志	吉林农业大学动物科学技术学院	174	668	12.0	19.0
3	孙丽敏	吉林农业大学动物科学技术学院	32	81	5.0	7.0
4	徐晶	长春科技学院动物科学技术学院	14	21	3.0	4.0
5	白曼	吉林农业大学动物科学技术学院	14	24	3.0	4.0
6	项露杰	吉林农业大学动物科学技术学院	5	4	1.0	2.0