呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备

• 作者: 向江艳 夏宁邵 张伟 詹炉停 赵敏 郑子峥
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 呼吸道合胞病毒 L蛋白 单克隆抗体 肽段展示
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1354-1359
• 页数: 6页
• 分类号: R373.1
• 字数: 3912字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2018.09.015

摘要

目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定.方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化.重组蛋白免疫6～8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫.融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定.结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果IgG1、IgG2a和IgG3单抗各3株,IgG2b单抗2株.结论:成功制备了L蛋白特异性单克隆抗体,也为RSV感染的免疫和发病机制研究奠定基础.