人转铁蛋白纯化制备及其抗原活性验证

• 作者: 史定刚 武强 章玉胜
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转铁蛋白 硫酸铵沉淀法 阴离子交换层析 抗原反应性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 779-783
• 页数: 5页
• 分类号: R977.6
• 字数: 4445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2018.07.004

摘要

目的 采用非亲和纯化方法从人血清中制备获得高纯度转铁蛋白(T RF),并用此为免疫抗原免疫新西兰大白兔,验证T RF蛋白的免疫原性.方法 首先采用两步硫酸铵沉淀法从血清中粗纯 T RF蛋白,再用两步阴离子交换层析柱进行纯化,最终得到 TRF.结果 TRF蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)纯度与外购纯品相当,且高效液相色谱(HPLC)纯度达到96.8%,纯化回收率为78.6%.对于同一批TRF样品, T RF检测试剂盒(免疫法)测得的活性浓度与紫外分光光度计法测得的蛋白浓度比值(Rc)约为0.95,说明制备的T RF与免疫检测试剂盒中的T RF抗体具有良好的抗原反应性.最后用纯化样品免疫新西兰大白兔,经过4次免疫后的抗血清效价滴度达到1:128000,说明制备的 T RF具有良好的免疫原性.结论 制备的高纯度T RF具有良好的抗原反应性及免疫原性,可用于动物免疫以制备抗T RF抗体,为配制T RF检测试剂(免疫法)提供良好的原料基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章玉胜		3	0	0.0	0.0
2	武强		2	0	0.0	0.0
3	史定刚		2	0	0.0	0.0