复合抗菌肽在毕赤酵母中的表达及其活性研究

• 作者: 孙万里 张旭光 杨桂茂 陶元勇
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 复合抗菌肽 天蚕素A 死亡素 毕赤酵母表达系统 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 1439-1442,1447
• 页数: 5页
• 分类号: R93|Q78
• 字数: 3816字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2018.12.009

摘要

目的 构建天蚕素A-死亡素复合基因工程抗菌肽基因CA(1-7)-T(4-19) ,并在毕赤酵母中表达.方法 采用重叠区基因扩增法(SOE)人工合成复合肽基因,同载体 pPICZαA 连接后转化毕赤酵母受体菌X-33 ,通过博莱霉素抗性筛选得到的阳性克隆用甲醇诱导表达,并对产物进行抗菌活性检测,建立抗菌谱.结果 复合肽基因CA(1-7)-T(4-19)成功克隆到载体pPICZαA上,鉴定结果与预先设计的基因序列一致,在甲醇诱导下复合肽基因得到表达,并得到临床分离的76株革兰阴性和革兰阳性耐药致病菌的最小抑菌浓度,最小抑菌浓度可达到5 μg/mL.结论 成功获得了具有抑菌活性的复合基因工程抗菌肽,且该复合肽对临床常见多重耐药菌株均有明显的抑杀作用.