传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 何亚鹏 时晓 杜迎春 韩姝伊
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性造血器官坏死病毒 环介导等温扩增 糖蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 76-81
• 页数: 6页
• 分类号: S941.41
• 字数: 4393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.07.017

摘要

本试验建立了一套逆转录环介导等温扩增方法(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),用于实验室及现场鲑鳟鱼传染性造血器官坏死病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测.针对IHNV的糖蛋白(glycoprotein,G)基因设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶及Bst DNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,结果阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本仍为红棕色.反应条件优化结果表明,最适反应温度为67℃;特异性试验表明,仅IHNV发生特异性扩增,鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)均不发生反应;敏感性试验表明,该LAMP方法最低可检出5.0×10-7μg的IHNV核酸.本研究所建立的IHNV检测方法成本低、操作简单、反应迅速,不依赖专门的仪器,同时具有较高的灵敏度和特异性,适合IHNV的现场检测和大批量样品检疫.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜迎春		21	43	3.0	6.0
2	时晓		18	25	2.0	5.0
3	何亚鹏		14	3	1.0	1.0
4	韩姝伊		6	6	1.0	2.0