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传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立
传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立
作者:
何亚鹏
时晓
杜迎春
韩姝伊
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
传染性造血器官坏死病毒
环介导等温扩增
糖蛋白
摘要:
本试验建立了一套逆转录环介导等温扩增方法(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),用于实验室及现场鲑鳟鱼传染性造血器官坏死病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测.针对IHNV的糖蛋白(glycoprotein,G)基因设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶及Bst DNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,结果阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本仍为红棕色.反应条件优化结果表明,最适反应温度为67℃;特异性试验表明,仅IHNV发生特异性扩增,鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)均不发生反应;敏感性试验表明,该LAMP方法最低可检出5.0×10-7μg的IHNV核酸.本研究所建立的IHNV检测方法成本低、操作简单、反应迅速,不依赖专门的仪器,同时具有较高的灵敏度和特异性,适合IHNV的现场检测和大批量样品检疫.
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文献信息
篇名
传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立
来源期刊
中国动物检疫
学科
农学
关键词
传染性造血器官坏死病毒
环介导等温扩增
糖蛋白
年,卷(期)
2019,(7)
所属期刊栏目
技术支撑
研究方向
页码范围
76-81
页数
6页
分类号
S941.41
字数
4393字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1005-944X.2019.07.017
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
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杜迎春
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时晓
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何亚鹏
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环介导等温扩增
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研究起点
研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
中国动物检疫
主办单位:
中国动物卫生与流行病学中心
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-944X
CN:
37-1246/S
开本:
16开
出版地:
青岛市南京路369号
邮发代号:
24-112
创刊时间:
1982
语种:
chi
出版文献量(篇)
8034
总下载数(次)
8
总被引数(次)
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