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摘要:
本试验建立了一套逆转录环介导等温扩增方法(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),用于实验室及现场鲑鳟鱼传染性造血器官坏死病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)检测.针对IHNV的糖蛋白(glycoprotein,G)基因设计特异性引物,以IHNV基因组RNA为模板,在反转录酶及Bst DNA聚合酶的作用下进行RT-LAMP,结果阳性样本表现为荧光绿色,阴性样本仍为红棕色.反应条件优化结果表明,最适反应温度为67℃;特异性试验表明,仅IHNV发生特异性扩增,鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)和病毒性出血性败血症病毒(VHSV)均不发生反应;敏感性试验表明,该LAMP方法最低可检出5.0×10-7μg的IHNV核酸.本研究所建立的IHNV检测方法成本低、操作简单、反应迅速,不依赖专门的仪器,同时具有较高的灵敏度和特异性,适合IHNV的现场检测和大批量样品检疫.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立
来源期刊 中国动物检疫 学科 农学
关键词 传染性造血器官坏死病毒 环介导等温扩增 糖蛋白
年,卷(期) 2019,(7) 所属期刊栏目 技术支撑
研究方向 页码范围 76-81
页数 6页 分类号 S941.41
字数 4393字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.07.017
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杜迎春 21 43 3.0 6.0
2 时晓 18 25 2.0 5.0
3 何亚鹏 14 3 1.0 1.0
4 韩姝伊 6 6 1.0 2.0
传播情况
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引文网络
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研究主题发展历程
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传染性造血器官坏死病毒
环介导等温扩增
糖蛋白
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
中国动物检疫
月刊
1005-944X
37-1246/S
16开
青岛市南京路369号
24-112
1982
chi
出版文献量(篇)
8034
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8
总被引数(次)
21278
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