凡纳滨对虾多酚氧化酶的纯化及性质分析

• 作者: 孙乐常 张凌晶 曹敏杰 李越 翁凌 鲍俊旺
• 来源期刊: 集美大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 凡纳滨对虾 多酚氧化酶 纯化 黑变
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 水产、食品与生物技术
• 页码范围: 100-109
• 页数: 10页
• 分类号: Q819
• 字数: 4368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19715/j.jmuzr.2019.02.03

摘要

通过硫酸铵盐析、DEAE-Cellulose离子交换、Phenyl-Sepharose疏水层析、Hi-Trap Capto-Q强阴离子交换层析等方法,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)虾头中分离纯化出一种多酚氧化酶(polyphe-nol oxidase,PPO),十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electro-pheresis,SDS-PAGE)显示其分子质量约为210 ku.肽质量指纹图谱的比对结果表明,纯化得到的PPO中含有187个氨基酸残基的14个片段与NCBI数据库中酚氧化酶原(gi|147724160)序列相似性为100％.该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和6.0,且在温度0～50℃及pH=5.0～8.0可保持相对稳定的活性.圆二色谱分析结果表明,对虾PPO的二级结构主要为反平行结构及无规则卷曲.抗坏血酸、 茶多酚和特丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,TBHQ)等具有生物活性羟基的抑制剂对其均有较好的抑制效果.