脊尾白虾2种血蓝蛋白大亚基变体的克隆及功能分析

• 作者: 刘九美 刘萍 孙东方 李健 李吉涛 环朋朋 窦全伟 蔡影
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 脊尾白虾 血蓝蛋白大亚基 变体 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 37-44
• 页数: 8页
• 分类号: S917.4
• 字数: 6061字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2019.005

摘要

为了探究血蓝蛋白的分子多样性,对脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)血蓝蛋白大亚基变体进行了研究.基于脊尾白虾转录组文库血蓝蛋白大亚基变体EcHcL1和2序列,利用RACE和生物信息学技术,对2种变体进行全长cDNA扩增和序列分析.结果发现EcHcL1和2 cDNA全长分别为2239和2132 bp,编码685和676个氨基酸.EcHcL1和2氨基酸序列在进化上相对保守,且均具有血蓝蛋白的典型结构域,包括铜离子结合区域、保守His位点和Ig-like区等,其中EcHcL1多了一个酪氨酸酶结构域,推测可能与色素代谢及酚氧化酶活性有关.组织表达分布结果显示EcHcL1和2在血细胞、肝胰腺、肠、腹神经节、心脏、卵巢、眼柄、胃、鳃和肌肉等组织中均有表达,且均在肝胰腺和血细胞中表达较高.采用Real-time PCR方法对病原感染后2种变体的mRNA表达情况进行分析.结果发现,EcHcL1在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和白斑综合征病毒(WSSV)胁迫脊尾白虾12-48h中出现较高表达量,最高表达量约为对照组的1.5-4倍;EcHcL2在胁迫后24-48h后,与对照组相比,表达量约上升2-9倍.由此说明,脊尾白虾血蓝蛋白大亚基变体与免疫防御密切相关,可能在抵抗病原微生物感染中发挥作用.