脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因的克隆及表达分析

• 作者: 刘九美 刘萍 孙东方 李健 李吉涛 环朋朋 窦全伟 蔡影
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 脊尾白虾 血蓝蛋白大亚基 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 86-93
• 页数: 8页
• 分类号: S917.4
• 字数: 6655字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7541/2018.011

摘要

应用RACE技术克隆脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因,并通过攻毒实验揭示脊尾白虾血蓝蛋白基因的先天免疫防御作用,为脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)的免疫防治研究提供依据和思路.研究成功克隆了脊尾白虾血蓝蛋白大亚基基因全长cDNA序列,该大亚基cDNA全长2192 bp,开放式阅读框长2034 bp,5′非编码区长21 bp,3′非编码区长137 bp,将该基因命名为EcHcL.EcHcL编码667个氨基酸,前21个氨基酸组成信号肽,推测成熟肽的分子量为78.5 kD.Blast比对结果显示,由脊尾白虾血蓝蛋白EcHcL序列推导的氨基酸序列与日本沼虾、凡纳滨对虾血蓝蛋白氨基酸序列的同源性分别达到87％、73％,其M结构域氨基酸序列与斑节对虾、日本对虾等物种同源性性高达90％ 左右,由此推断该cDNA序列属于血蓝蛋白家族.组织表达分析结果显示,EcHcL基因在脊尾白虾鳃、卵巢、肝胰腺、心脏、肠、肌肉、胃、腹神经节、眼柄、血细胞中均有表达,肝胰腺中相对表达量最高.Real-time PCR分析发现EcHcL基因在金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌和对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后脊尾白虾肝胰腺和血细胞中的表达量显著增加,并具有不同的时空表达模式,推测脊尾白虾EcHcL基因在免疫防御中具有重要作用.