牛细小病毒DPO-PCR检测方法的建立

• 作者: 乔薪瑗 唐丽杰 徐义刚 李一经 李振雪 汤婷婷 王丽 王孟孟 王瑞翀
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛细小病毒 DPO-PCR 快速检测
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 269-273
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0045

摘要

为建立牛细小病毒的快速检测方法,以牛细小病毒VP2基因为靶基因,设计了1对双启动寡核苷酸(dual-priming oligonucleotide,DPO)引物,建立了牛细小病毒DPO-PCR快速检测方法.退火温度不敏感试验、特异性试验和灵敏度试验的结果显示,与常规PCR方法相比,DPO-PCR方法在41～65℃退火温度范围内均能够高效地扩增出目的基因,表明DPO引物对退火温度不敏感;该方法的最低检出量为3.94×103copies/μL;通过对牛细小病毒、牛轮状病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒进行检测,只有牛细小病毒的检测结果为阳性,且无非特异性扩增.结果表明,建立的DPO-PCR方法同传统PCR方法相比,特异性强、灵敏度高,为牛细小病毒的快速检测提供了一种新方法.