miR-7基因敲减对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响

• 作者: 丁涛 岳东旭 徐林 赵娟娟 郭萌萌 陈慧子 陈超
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-7 基因敲减 巨噬细胞 炎症
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 195-200,216
• 页数: 7页
• 分类号: R392.1
• 语种: 中文

摘要

观察miR-7基因敲减(knockdown,KD)对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,并初步探讨其机制.分别用0、50、100、200 ng/mL LPS刺激野生型(wild type,WT)小鼠骨髓来源巨噬细胞12h,经实时荧光定量PCR(real-time fluorescencequantitative PCR,Real-time PCR)检测发现,随着LPS刺激浓度的增加,巨噬细胞中miR-7的表达水平逐渐升高,且在100 ng/mL LPS浓度刺激下miR-7表达最显著(P＜0.01).用100 ng/mL LPS处理miR-7 KD小鼠和WT小鼠骨髓来源巨噬细胞12h,镜检观察到巨噬细胞形态均由圆形变为长梭形,并伸出长长的伪足.应用流式细胞术检测巨噬细胞表面CD80和CD86分子的表达情况,结果显示,LPS作用后,miR-7 KD小鼠骨髓来源巨噬细胞表面CD80和CD86的比例较WT小鼠显著上调(P＜0.05).Real-time PCR和ELISA结果显示,miR-7 KD小鼠巨噬细胞在LPS刺激后,炎性因子IL-1p、IL-6和TNF-a的表达显著增加(P＜0.05).Western blotting检测结果显示,LPS刺激后,与对照组相比,miR-7KD小鼠巨噬细胞中NF-κB p65和p-NF-κB p65的蛋白水平显著升高(P＜0.01).以上数据显示,miR-7基因KD可显著增强LPS诱导的巨噬细胞炎症反应,可能与NF-κB信号通路的传递增强有关,提示miR-7在巨噬细胞炎症过程中发挥重要的调控作用.