CHO细胞法检测百日咳毒素毒性的影响因素

• 作者: 刘波 张立志 徐树利 王巍巍 王治伟 程会欣 董高峰 薛晨宝 许丽 马国涛 高强
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 中华仓鼠卵巢细胞 簇集试验 百日咳毒素 牛血清 组胺致敏试验
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-35
• 页数: 7页
• 分类号: R392-33
• 字数: 4647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2019.02.005

摘要

目的 考察不同培养基、不同牛血清、血清灭活与否及生产过程中添加的各外源物质对百日咳毒素(pertussis toxin,PT)在中华仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell,CHO)簇集试验中的影响.方法 分别使用3种培养基F-12K、DMEM/F12和1640培养CHO细胞,并进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及PT引起细胞簇集的敏感性;分别选取2个厂家的牛血清(对2种血清进行灭活和不灭活处理)培养CHO细胞,观察4种牛血清对细胞生长及簇集的影响;选用生产过程中添加的物质进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及是否出现簇集,确定不影响细胞生长的最高浓度,同时使用不影响细胞生长的各添加物质最高浓度进行小鼠组胺致敏试验,观察与CHO细胞簇集试验结果是否一致.结果 3种培养基对CHO细胞生长及CHO细胞簇集存在明显差异,F-12K培养基培养的细胞形态规则、典型,其他2种培养基培养的细胞生长缓慢,且对PT的敏感性均低于F-12K培养基;4种牛血清中胎牛血清培养的细胞生长最快且形态规则,簇集试验敏感性优于其他3组血清;添加的各外源物质均会导致细胞生长缓慢或死亡,在稀释至一定浓度后可以排除添加物质对CHO细胞簇集试验的影响,同时在小鼠组胺致敏试验中不会引起动物死亡.结论 F-12K培养基最适宜实验室CHO细胞生长,不同血清对细胞生长和簇集的敏感度有一定差异,添加的外源物质残留量应进行控制以保证试验结果的稳定可靠.