XPO1抑制剂KPT-8602对U937细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 尹松梅 李益清 聂大年 肖晓慧 肖洁 谢双锋 马丽萍 黄克智
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: XPO1 KPT-8602 U937细胞 周期 凋亡 AKT
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 37-45
• 页数: 9页
• 分类号: R733
• 字数: 4791字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨核输出蛋白(XPO1)选择性抑制剂KPT-8602对人组织细胞淋巴瘤细胞系U937细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的机制研究.[方法]以U937细胞为研究对象,给予不同浓度的KPT-8602处理细胞后,CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡;Western blot法检测XPO1、p-AKT、AKT、Cleaved Caspase-3、p21的表达情况;荧光显微镜观察XPO1的亚细胞定位.[结果]CCK-8结果显示KPT-8602可抑制U937细胞的活力,在一定范围内具有剂量-效应依赖关系(P＜0.001)及时间-效应依赖关系(P＜0.001),但是对正常人外周血单个核细胞(PBMC)无明显影响;流式细胞仪检测显示不同浓度KPT-8602作用U937细胞48 h后,各组细胞周期停滞在G1期的比例增加(P＜0.001),细胞凋亡率增加(P=0.016);Western blot结果显示与正常人PBMC相比,U937细胞的XPO1表达明显升高(P=0.003);KPT-8602处理U937细胞后,XPO1表达下降(P=0.011),Cleaved Caspase-3表达增加(P=0.009),p-AKT表达下降(P=0.011),胞核及胞浆的XPO1蛋白的表达均下降(P＜0.05),货物蛋白p21在胞浆胞核的表达均升高(P＜0.05);荧光显微镜下观察到KPT-8602处理U937细胞后,XPO1在胞浆胞核中的表达均下降.[结论]KPT-8602能抑制U937细胞增殖,使细胞周期阻滞于G1期,诱导细胞凋亡;其机制可能与下调XPO1表达,抑制PI3K/AKT通路有关.