类鼻疽杆菌通过抑制自噬调控HepG2细胞胞内脂质代谢

• 作者: 唐梦灵 张雨 李倩 毛旭虎 胡治强 袁思琪 谢建平 饶承龙
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 类鼻疽杆菌 HepG2细胞 自噬 脂代谢
• 年，卷（期）: 2019,（18）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1722-1729
• 页数: 8页
• 分类号: R322.47|R329.28|R378.99
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.201906061

摘要

目的 探讨类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后诱导的自噬抑制对胞内脂质代谢的调控作用.方法 类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h为感染组,以未感染组作为对照.激光共聚焦显微镜观测各组细胞内脂滴和GFP-自噬点的数量;定量试剂盒检测各组细胞内甘油三酯及胆固醇水平;Western blot检测各组细胞中自噬相关蛋白LC3Ⅱ、p62表达水平.利用自噬抑制剂3-MA、Baf-A1以及自噬激活剂Rapa处理细胞,检测改变宿主细胞自噬水平后,对类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后胞内脂质代谢的影响;外源加入游离脂肪酸三醋酸甘油酯,通过细菌胞内计数实验检测类鼻疽杆菌胞内存活情况.结果 类鼻疽杆菌感染HepG2细胞6、12、24 h后,与未感染组比较,胞内脂滴数量增多,脂质成分甘油三酯和胆固醇水平也随感染时间延长逐渐升高,且在感染24 h后达到最高水平(P<0.01);自噬检测发现,与未感染组比较,LC3Ⅱ蛋白表达随感染时间逐渐下降,p62蛋白表达水平随感染时间逐渐蓄积,胞内自噬小体的数量也随感染时间逐渐减少,且感染24 h后数量最低(P<0.01),提示类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后自噬受抑;使用自噬抑制剂3-MA、Baf-A1以及自噬激活剂Rapa处理细胞后,与对照组比较,抑制自噬导致胞内脂质蓄积加重(P<0.01),而激活自噬可以减轻胞内脂质的蓄积(P<0.01);此外,外源补充三醋酸甘油酯促进宿主细胞脂质代谢速率能明显降低类鼻疽杆菌胞内存活量(P<0.01).结论 类鼻疽杆菌感染HepG2细胞后,通过诱导自噬抑制调控HepG2细胞胞内脂质代谢.