白背飞虱海藻糖合成酶基因的表达特性及其在糖代谢调控中的作用

• 作者: 余亚娅 唐斌 康奎 张道伟 曾伯平 邱玲玉 陈静
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 白背飞虱 海藻糖合成酶 海藻糖代谢 RNA干扰 qRT-PCR
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 1117-1128
• 页数: 12页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2019.10.001

摘要

[目的]昆虫中海藻糖主要通过海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)在脂肪体中合成,当昆虫受极端环境胁迫时TPS能够诱导海藻糖累积从而起到保护作用.本研究旨在分析白背飞虱Sogatella furcifera两个TPS基因的发育和组织表达模式及其对糖类物质代谢调控功能,探究TPS基因在白背飞虱生长发育中的具体作用.[方法]基于实验室前期获得的两个海藻糖合成酶基因SfTPS1和SfTPS2片段序列,在本实验中也进行了基因克隆和测序筛选,比对两者确定了白背飞虱两个TPS基因序列.并通过MEGA 7.0软件构建基于氨基酸序列的白背飞虱与其他昆虫TPS的系统发育树.利用qRT-PCR技术检测这两个基因在白背飞虱不同发育阶段(4龄第1天若虫至3日龄成虫)和成虫不同组织(头、足、翅、中肠、脂肪体、表皮和马氏管)中的表达情况.合成这两个基因的dsRNA,并注射到白背飞虱5龄第1天若虫中进行RNAi.在RNAi 48和72 h后检测白背飞虱海藻糖酶基因TRE1-1,TRE1-2和TRE2的表达变化,海藻糖、葡萄糖和总糖原含量以及海藻糖酶活性.[结果]克隆获得白背飞虱SfTPS1和SfTPS2,ORF分别为2 424和2 115 bp,编码氨基酸数目分别为807个和704个,预测蛋白质分子量分别为90.37和80.56 kD,等电点分别为6.08和6.10.而且白背飞虱2个TPS氨基酸序列与褐飞虱Nilaparvata lugens TPS1和TPS2的一致性最高.发育阶段表达模式表明,白背飞虱TPS基因SfTPS1和SfTPS2在4龄若虫到成虫阶段都有表达;组织表达模式表明,SfTPS1和SfTPS2在成虫马氏管、中肠和表皮中的表达较为显著.当SfTPS1被RNAi后,TRE1-1和TRE2的表达水平与对照组(dsGFP注射组)相比分别为略有上升和显著升高,TRE 1-2的相对表达水平在SfTPS1被RNAi 48 h后显著上升而在72 h后显著下降;可溶性海藻糖酶活性无显著变化,膜结合型海藻糖酶活性显著增加;白背飞虱5龄若虫体内海藻糖、葡萄糖和总糖原含量显著上升.TRE1-2和TRE2基因的表达水平在SPS2被RNAi 48 h后显著升高,而在72 h后两基因的表达水平却显著下降;TRE1-1基因的表达水平在注射dsSfTPS2 48和72 h后均显著上升.可溶性海藻糖酶活性在SfTPS2被RNAi 48 h后显著下降,72 h后显著上升;膜结合型海藻糖酶活性在SfTPS2被RNAi 72 h后显著增加.白背飞虱5龄若虫体内葡萄糖含量在SfTPS2基因RNAi 48 h后显著减少,但在72 h后海藻糖、葡萄糖和总糖原含量显著上升.[结论]通过调节白背飞虱体内TPS基因的表达影响TRE1-1,TRE 1-2及TRE2基因的表达水平,进而调控体内海藻糖的含量,该结果为后期采用TPS为靶标基因用于害虫防治提供理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐斌	遵义师范学院生物与农业科技学院	27	230	8.0	14.0
3	张道伟	遵义师范学院生物与农业科技学院	12	53	5.0	7.0
4	曾伯平	遵义师范学院生物与农业科技学院	17	17	3.0	3.0
5	邱玲玉	杭州师范大学生命与环境科学学院	3	4	1.0	2.0
6	陈静	遵义医科大学基础医学院	7	2	1.0	1.0
9	康奎	遵义师范学院生物与农业科技学院	2	0	0.0	0.0
10	余亚娅	遵义医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0