猪源IFN-λ3的克隆、表达及抗病毒活性分析

• 作者: 付婷婷 姜宇航 宋利娜 李昌 许汪 郝鹏飞 金宁一 金鑫 陈竞
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪IFN-λ3 猪肺巨噬细胞 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 分类号: S852.42
• 字数: 4114字
• 语种: 中文

摘要

为了解猪源IFN-λ3的体外抗病毒活性,本研究利用RT-PCR技术从猪肺巨噬细胞(CRL2845)中扩增获得猪源IFN-λ3基因(pIFN-λ3),并将pIFN-λ3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pCDNA3.1-pIFN-λ3,利用脂质体转染293细胞.48 h后通过Western blot分析pIFN-λ3瞬时表达情况,取转染后上清分别作用于PK15、MDCK细胞进行pIFN-λ3抗病毒活性分析.结果 显示,本研究成功扩增获得pIFN-λ3基因,并在293细胞内成功表达;瞬时表达能够抑制表达绿色荧光蛋白的重组水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus-green fluorescent protein,VSVG)在PK15、MDCK细胞上的增殖.本研究结果为深入研究猪源IFN-λ3在宿主抗病毒免疫和黏膜免疫中的作用机理及其应用提供参考和依据.