重组猪源IFN-λ1植物乳杆菌的构建与表达验证

• 作者: 付婷婷 姜宇航 李昌 王茂鹏 许汪 金宁一 陈竞 韩继成 马彬尧
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 3型干扰素 植物乳酸菌 构建与表达
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 35-39,43
• 页数: 6页
• 分类号: TQ929+1
• 语种: 中文

摘要

为构建猪源3型干扰素(pIFN-λ1)的重组植物乳杆菌并进行验证.通过PCR方法扩增含有植物乳杆菌锚定信号肽的猪源IFN-λ1基因(pIFN-λ1),插入到pSIP411表达载体电转入到中间克隆宿主菌NZ3900中,获得重组质粒pSIP-pIFN-λ1;再次电转入到表达宿主植物乳杆菌Lp18获得重组植物乳杆菌;制备重组植物乳杆菌并验证其表达.结果 显示,成功扩增出650 bp目的条带,电转入植物乳杆菌Lp18中成功构建重组Lp18:pSIP-pIFN-λ1.Western Blot、免疫荧光和流式细胞分析等方法验证重组蛋白pIFN-λ1的表达,获得阳性结果,阳性率为22.96％,且进一步证明其展示并锚定在植物乳杆菌表面.本试验成功构建了1株能稳定表达猪源IFN-λ1蛋白的重组植物乳杆菌,为猪源IFN-λ1的开发应用研究提供理论基础.