基于CRISPR/Cas9加工番茄α-Man突变体的构建

• 作者: 崔百明 张圆圆 邵冬南
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 加工番茄 CRISPR/Cas9 α-Man 果实成熟软化
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0134

摘要

为培育成熟果实软化程度低,货架期长的番茄植株,以加工番茄甘露糖苷酶基因(α-Man)为编辑对象,设计由番茄U6启动子驱动、长21 bp的guide RNA(gRNA)指导hCas9核酸酶,靶向编辑 α-Man的第1个外显子.首先构建基于CRISPR/Cas9系统的植物表达载体,并通过农杆菌介导的遗传转化获得加工番茄转基因株系,然后取转基因番茄叶片基因组DNA,利用限制性内切酶法结合PCR扩增对 α-Man编辑位点附近的DNA片段进行检测及测序分析.结果表明,14株转基因番茄植株有2株检测到突变现象.α-Man突变体TA克隆测序结果显示有2种编辑类型,一种表现为52 bp的缺失突变;另一种表现为单碱基突变.实现了对番茄 α-Man的编辑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔百明	石河子大学生命科学学院	35	233	11.0	14.0
2	张圆圆	石河子大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
3	邵冬南	石河子大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0