三角褐指藻PtCryP基因的克隆及敲除载体构建

• 作者: 何文锦 赵靖悦 陈由强 雷娜娜 龚林
• 来源期刊: 福建轻纺
• 学科: 农学
• 关键词: 三角褐指藻 CryP基因 生物信息学分析 CRISPR/Cas9
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 8-16
• 页数: 9页
• 分类号: S154.38+4
• 字数: 5701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-550X.2019.12.001

摘要

文章旨在获得三角褐指藻中隐花色素CryP的全长序列并进行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系统的pKSdiaCas-sgRNA质粒,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了三角褐指藻PtCryP的敲除载体,并通过DNA测序确定插入了sgRNA序列.PtCryP基因的开放阅读框全长为1575 bp,编码524个氨基酸,预测的等电点8.30,理论分子量58.98kD.通过结构域分析,隐花色素蛋白的典型结构域存在于PtCryP蛋白中.本研究首次构建了三角褐指藻PtCryP的CRISPR/Cas9敲除载体,为下一步三角褐指藻CryP的表达和功能研究奠定基础.