烟草18S rDNA染色体原位杂交技术优化研究

• 作者: 党江波 张艳 曹帅 杨超 梁国鲁 王金英 陈益银
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 关键词: 烟草 18S rDNA 探针 FISH 5S rDNA
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 78-84
• 页数: 7页
• 字数: 6332字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16472/j.chinatobacco.2018.271

摘要

荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)在细胞遗传学中有较多应用,其中重复序列常被作为探针来研究物种进化、分类.但现常用的探针序列均较长(200 bp-500 bp),杂交耗时较多.本研究以烟草(Nictiana tabacum)为材料,克隆并标记18S rDNA保守序列(254 bp),以其为探针对烟草染色体进行FISH,经18h杂交获得了清晰的信号.在此基础上,利用荧光素直接标记引物序列(寡聚核苷酸),经较短时间(2 h)的杂交,也获得了清晰的信号.以寡聚核苷酸为探针对云烟87四倍体、N.tabacum-N.plumbaginifolia五倍体、烟草六倍体、云烟87八倍体以及N.plumbaginifolia的染色体进行杂交,均获得了良好效果.且杂交液可简化配制,洗脱过程也可简化.18S rDNA寡聚核苷酸探针与5S rDNA寡聚核苷酸探针结合,实现了N.plumbaginifolia的18S rDNA和5S rDNA双色FISH.所以,该寡聚核苷酸序列可以应用于烟草属植物18S rDNA (45S rDNA)位点的分析,且较大程度缩短了操作时间并简化了操作过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨超	中国烟草总公司重庆市公司烟草科学研究所	5	29	2.0	5.0
2	梁国鲁	西南大学园艺园林学院	168	1619	20.0	30.0
3	陈益银	中国烟草总公司重庆市公司	4	4	1.0	2.0
4	党江波	西南大学园艺园林学院	29	54	4.0	6.0
5	张艳	中国烟草总公司重庆市公司烟草科学研究所	5	8	2.0	2.0
6	曹帅	西南大学园艺园林学院	3	4	1.0	2.0
7	王金英	西南大学园艺园林学院	1	0	0.0	0.0