登革病毒血清型2E蛋白Ⅲ区单克隆抗体的制备及其诊断特异性研究

• 作者: 周湧超 文金生 杨澜 段志良 金胜威 陈新宇
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 E蛋白Ⅲ区 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-125
• 页数: 6页
• 分类号: R392.33
• 语种: 中文

摘要

本研究旨在制备抗登革病毒(dengue virus,DENV)血清型2(DENV2)E蛋白Ⅲ区(envelope protein domainⅢ,ED Ⅲ)单克隆抗体(简称单抗)并研究其诊断特异性.合成编码DENV2-EDⅢ的基因并将其克隆入原核表达质粒pET21a;将重组质粒转入大肠埃希菌菌株BL21;用重组表达的EDⅢ免疫小鼠;将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0融合;将可产生识别抗EDⅢ单抗的杂交瘤细胞注入小鼠腹腔;采用蛋白G亲和层析法从腹水中纯化单抗;采用间接ELISA和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)评估所制备的单抗识别DENV血清型1～4 (DENV1～～4)的能力.本研究成功表达了DENV2-EDⅢ,并制备出3株杂交瘤细胞,杂交瘤细胞所分泌的小鼠源性单抗既可识别DENV2,又可交叉识别DENV1、DENV3和DENV4.