miR-9-5p下调FRMD6促喉癌Hep2细胞存活的机制研究

• 作者: 唐亮 程秀琴 艾力根·阿不都热依木 谭元元
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-9-5p FRMD6 人喉癌Hep2细胞存活 Hippo/YAP
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 63-69
• 页数: 7页
• 分类号: R739-65
• 字数: 4889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2019.08.015

摘要

目的 探讨miR-9-5p通过下调FRMD6表达促进喉癌Hep2细胞存活的具体机制.方法 通过实时荧光定量PCR检测miR-9-5p、FRMD6在人喉癌组织中的表达情况.Hep2细胞转染对照抑制剂作为对照组,实验组分别转染miR-9-5p抑制剂、FRMD6、miR-9-5p抑制剂+FRMD6,利用MTT、细胞克隆形成实验等观察miR-9-5p及FRMD6对Hep2细胞增殖活力的影响;caspase-3蛋白活性检测以评估miR-9-5 p、FRMD6对Hep2细胞的凋亡情况.对照组转染阴性对照,实验组分别转染miR-9-5p mimics,Western blot法检测过表达细胞中FRMD6的表达;Luciferase实验验证miR-9-5p与FRMD6 3’-UTR的结合.对照组转染阴性对照/抑制剂,实验组分别转染miR-9-5p对照/抑制剂,RT-PCR、Western blot法分别检测转染细胞中miR-9-5 p、FRMD6、YAP等表达情况.结果 RT-PCR法检测结果显示,喉癌组织中miR-9-5p表达增加而FRMD6表达下降.MTT及细胞克隆形成实验结果显示,Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6过表达活细胞数量均明显减少,增殖能力显著下降(P＜0.05),而两者共瞬转后,细胞增殖能力较单转染组显著降低(P＜ 0.05);caspase-3蛋白活性:Hep2细胞分别瞬转miR-9-5p抑制剂或FRMD6细胞凋亡增加(P＜0.05),而两者共瞬转后细胞凋亡较单转染组高(P＜0.05).Westernblot法检测结果显示,Hep2细胞过表达miR-9-5p后FRMD6表达减少;Luciferase实验结果显示,miR-9-5p与FRMD6 3’-UTR直接结合.RT-PCR及Western blot法检测结果显示,miR-9-5p阴性组FRMD6转录及翻译显著降低,YAP mRNA及蛋白表达则显著上调(P＜0.05);miR-9-5p抑制剂组FRMD6的表达升高,而YAP表达降低(P＜0.05).结论 miR-9-5p通过抑制FRMD6基因表达,促进人喉癌组织及Hep2细胞增殖存活,抑制细胞凋亡,这个过程可能与Hippo-YAP通路受抑制有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐亮	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉诊疗中心	47	50	4.0	5.0
2	谭元元	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉诊疗中心	12	8	2.0	2.0
3	艾力根·阿不都热依木	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉诊疗中心	11	15	1.0	3.0
4	程秀琴	新疆维吾尔自治区人民医院耳鼻喉诊疗中心	19	31	3.0	5.0