雷帕霉素靶蛋白复合物1对Hela细胞微管蛋白稳定性的影响

• 作者: 周小明 季佩宇 张建新 徐进 毛正发 王旭青
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 雷帕霉素靶蛋白复合物1 微管 Ras同源基因家族成员A 自噬 Hela细胞
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 467-471
• 页数: 5页
• 分类号: R73-3
• 字数: 4070字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y190162

摘要

目的:探讨雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)对Hela细胞微管稳定性的影响及可能机制.方法:使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,加入5μmol的诺考达唑处理30、60和120 min,免疫荧光检测微管蛋白的稳定性;使用50 nmol/L雷帕霉素处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测促微管解聚蛋白stathmin、KIF2A,促微管聚合蛋白CLIP170,微管切割蛋白Katanin、Spastin的表达变化.转染ATG5-shRNA抑制自噬相关基因5(autophagy-related gene5,ATG5)后,免疫荧光检测微管蛋白稳定性的改变.使用50 nmol/L雷帕霉素预处理Hela细胞24 h后,蛋白质印迹检测Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family member A,RhoA)的表达;转染GFP RhoA-Q63L或GFP RhoA-N19、p190RhoGAP-siRNA质粒后,免疫荧光检测微管稳定性的改变.结果:用雷帕霉素抑制mTORC1的活性后Hela细胞微管的稳定性增强,但微管稳定性相关蛋白stathmin、KIF2A、CLIP170、Katanin、Spastin无明显变化.抑制细胞自噬后,微管的稳定性无明显改变.雷帕霉素抑制mTORC1的活性后RhoA GTP酶的活化水平下调;下调p190RhoGAP的活化水平后,微管的稳定性减弱.结论:RhoA在mTORC1介导的Hela细胞微管稳定性中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐进	江苏大学医学院	8	28	4.0	5.0
2	张建新	江苏大学附属医院普通外科	90	386	11.0	13.0
3	王旭青	江苏大学附属医院普通外科	27	107	7.0	9.0
4	毛正发	江苏大学附属医院普通外科	17	67	6.0	7.0
5	季佩宇	江苏大学附属医院普通外科	1	0	0.0	0.0
6	周小明	江苏大学医学院	2	0	0.0	0.0