牛病毒性腹泻病毒Real-time PCR检测方法的建立

• 作者: 任晨玮 索朗斯珠 罗润波
• 来源期刊: 高原农业
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 实时荧光定量RT-PCR 检测
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 页码范围: 187-192,230
• 页数: 7页
• 分类号: S858.23
• 语种: 中文
• DOI: 10.19707/j.cnki.jpa.2019.02.012

摘要

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'端非编码区(5'UTR)的核苷酸序列,设计特异性扩增引物,建立BVDV的实时荧光定量PCR检测方法.建立的方法只能检测到BVDV,与猪瘟病毒等没有交叉反应,具有高度特异性;在101～108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.993,最低可检测到3.0×104个拷贝数的病毒核酸,其敏感性为普通PCR的100倍,具有灵敏度高的特点;不同情况下3次重复实验,变异系数小于2.8％,具有重复性好的特点.本研究建立的BVDV荧光定量PCR检测方法可以用于牛病毒性腹泻病变的早期诊断和病毒鉴定.