国内建立的人肿瘤细胞系的身份认证问题及对策

• 作者: 冯海凉 刘玉琴 卞晓翠 杨振丽
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 短串联重复序列分型 交叉污染 特性鉴定 聚合酶链反应 肿瘤细胞 细胞培养 人
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 肿瘤生物学
• 页码范围: 201-210
• 页数: 10页
• 分类号: R73
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2019.02.010

摘要

目的 为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性.方法 收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染.对怀疑HeLa细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段.对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞.结果 本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品.本中心建立的6株细胞系均STR正确.其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62.2％)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞HeLa是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞SiHa、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染.结论 国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞.另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉琴	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心	59	272	9.0	14.0
2	杨振丽	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心	9	29	2.0	5.0
3	卞晓翠	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心	8	11	2.0	2.0
4	冯海凉	中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心	9	28	3.0	4.0