幽门螺杆菌Tipα蛋白的表达、纯化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 张洁雅 张艳 曾莎莎 李杰 段洁 肖灵巧 陈国栋 韩亮
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 Tipα蛋白 IL-6/STAT3信号通路 胃癌 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1024-1028
• 页数: 5页
• 分类号: R378.99
• 语种: 中文
• DOI: 10.13350/j.cjpb.190908

摘要

目的 表达并纯化重组幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)肿瘤坏死因子-α诱导蛋白(tumor necrosis factor-α-inducing protein,Tipα),观察其对胃癌细胞增殖和迁移的影响以及IL-6/STAT3信号通路在其中的作用. 方法 采用IPTG诱导表达Tipα重组蛋白并通过Ni2+亲和层析纯化,纯化产物进行SDS-PAGE和Western blot鉴定;使用重组Tipα蛋白刺激胃癌SGC7901细胞,分别采用CCK8、流式细胞术、划痕伤口愈合试验和Transwell试验检测其对细胞增殖、凋亡和迁移的影响. 结果 可溶性25×10 3重组Tipα蛋白被成功诱导表达且能被抗His-tag单克隆抗体所识别.与空白对照组相比,Tipα蛋白能够抑制SGC7901细胞凋亡(t=9.53;P＜0.05).与PBS组相比,Tipα组细胞的增殖和迁移能力增加,而IL-6单克隆抗体或STAT3抑制剂SH-4-54预处理能够减弱Tipα诱导的细胞增殖和迁移(CCK8实验,F=103.194,P＜0.01;划痕伤口愈合试验,F=15.568,P＜0.01;Transwell试验,F=36.017,P＜0.01). 结论 Hp Tipα蛋白可促进胃癌细胞增殖和迁移,IL-6/STAT3信号通路在其中发挥重要作用.