鸡源产气荚膜梭菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

• 作者: M Umar Zafar Khan 王恒 王艳华 蔡建平 许笑
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 产气荚膜梭菌 重组酶聚合酶扩增技术 荧光定量检测 鸡坏死性肠炎
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1475-1483
• 页数: 9页
• 分类号: S852.616
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0194

摘要

为建立鸡源产气芙膜梭菌(Clostridium perfringens)的快速诊断方法,本研究以产气荚膜後菌α-毒素的编码基因 plc为基础设计、合成引物和探针,并以 real-time PCR的方法进行验证,建立了鸡源产气荚膜梭菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测方法.该方法可在 38℃ 、25min内对产气荚膜梭菌的 α-毒素编码序列进行快速特异性扩增,最低检测限量可达 1× 101 copies/μL ,灵敏度良好.以此方法检测实验室保存的临床样本,其检测结果与 real-timePCR的检测结果一效.上述结果表明,本研究建立的 real-time RPA方法在检测鸡源产气荚膜梭菌时具有操作简单、快速灵敏的特点,适用于鸡源产气芙膜梭菌的临床检测.