SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH去势抗原免疫学及生物学效果对比研究

• 作者: 储明星 曹晓涵 曾宪垠 李俊丽 韩兴发
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: GnRH 新蛋白构型 免疫去势 大鼠
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术与繁殖
• 页码范围: 738-749
• 页数: 12页
• 分类号: S814.1
• 字数: 8737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.04.007

摘要

旨在对比研究SD雄鼠3种不同新蛋白构型GnRH抗原的免疫学及生物学效果.本研究新蛋白构型GnRH抗原设计采用增加GnRH拷贝数和增大抗原分子量方法.以化学合成法合成G6K-GnRH并列体(G6 K-GnRH-tandem,G6KT)作为新蛋白GnRH抗原制备的基本单元.将G6KT二聚化,形成抗原Ⅰ(G6KTD),将G6KT和G6KTD分别与卵清蛋白(OVA)偶联,分别形成抗原Π(G6KT-OVA)及抗原Ⅲ(G6KTD-OVA).试验分5组:完整对照组(不做任何处理,intact control)、外科阉割去势组(surgical castrates)及3种新蛋白构型GnRH免疫组(G6KTD、G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组).将(G6KTD、G6KT-OVA、G6KTD-OVA)3种不同新蛋白构型GnRH抗原配于Specol佐剂,分别免疫SD雄鼠,6周龄时初免,腿部肌肉注射1 mL乳化抗原(含相应新构型Gn-RH蛋白100 μg),8周后加免,注射剂量与方法同初次免疫,每试验组12只雄鼠.放免法及酶联免疫法测定血清抗体及生殖激素浓度变化,qPCR检测垂体-睾丸生殖相关基因mRNA表达变化.结果 显示:1)SD雄鼠主动免疫3种不同新蛋白构型GnRH抗原后均能产生良好的抗体反应.2)G6KT-OVA及G6KTD-OVA免疫组仅初免就能诱发较高水平的抗体产生,并显著降低雄鼠血清LH、FSH、睾酮(T)及抑制素B(INHB)浓度(P＜0.05);试验结束时,该两种抗原免疫组雄鼠睾丸重量及体积均降低,精子发生完全被终止,垂体GnR HR、LHβ、FSHβ及睾丸LHR、FSHR、INHα、INβA及INHβB mRNA表达显著下调(P＜0.05).3)G6KTD免疫组12只雄鼠中,9只(75％)在加免后血清LH、FSH、T及INHB浓度显著降低(P＜0.05),试验结束时睾丸重量及体积均显著降低(P＜0.05),精子发生受到明显抑制(P＜0.05).综上表明:新蛋白构型G6KT-OVA和G6KTD-OVA具有极强的免疫原性,初次免疫就能达到抑制生殖激素分泌的目的,在作为单剂量GnRH疫苗方面具良好的开发前景;同时G6KTD也具有较强的免疫原性,可不与载体蛋白偶联单独作为GnRH去势抗原,继而避开GnRH分子与载体蛋白偶联所面临的GnRH抗原损失严重及与载体蛋白偶联的后续纯化等问题.本研究结果为研发高效GnRH去势疫苗及其大规模应用提供了理论参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	储明星	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室	193	3298	33.0	50.0
2	曾宪垠	四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室	65	343	12.0	15.0
3	曹晓涵	四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室	15	51	5.0	7.0
4	韩兴发	四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室	9	50	4.0	7.0
5	李俊丽	四川农业大学生命科学学院原子能农业应用研究室	2	21	1.0	2.0