猪繁殖与呼吸综合征病毒 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立与应用

• 作者: 刘雪威 姜平 宋中宝 张杰 白娟
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量 PCR
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1505-1513
• 页数: 9页
• 分类号: S852.651
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0200

摘要

本研究根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,设计出一对引物,建立了检测该病毒的 SYBR Green Ⅰ 染料荧光定量 PCR方法.此法特异性高,与猪流行性腹泻(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV) 、塞内卡谷病毒(SVV)、脑心肌炎病毒(EMCV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒 2 型 (PCV2)均无交叉反应;采用不同漓度的 PRRSV测定,当 Ct≤32且有明显的指数扩增曲线,判定为 PRRSV 阳性,C4＞32或者无Ct值则判定为 PRRSV 阴性.该方法检测下限为 1× 100.5TCID50病毒,高于常规 RT-PCR 国家标准(GB/T18090-2008) ,批内和批间变异系数均小于 1%. PRRSV人工感染仔猪 15份肺脏组织和 60份血清样品检测结果均为阳性,SPF仔猪 8份肺脏组织和 25份血清检测结果均为阴性.采集 245份临床仔猪肺脏组织病料检测,PRRSV阳性率为 67.35%,明显高于普通 RT-PCR检测阳性率(56.33%).上述结果表明,本方法可用于 PRRSV临床病料检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜平		186	1921	25.0	35.0
2	张杰		20	654	12.0	20.0
3	白娟		37	73	5.0	7.0
4	刘雪威		3	0	0.0	0.0
5	宋中宝		4	0	0.0	0.0