三疣梭子蟹心激肽基因克隆及在低盐适应中的功能验证

• 作者: 刘萍 吕建建 孙东方 环朋朋 蔡影 高保全
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 三疣梭子蟹 甲壳动物心激肽 基因克隆 盐度胁迫 多肽注射
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 261-270
• 页数: 10页
• 分类号: S917
• 字数: 5289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2019.18207

摘要

采用RACE技术克隆获得三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)心激肽(CCAP)基因.该基因全长606 bp,5'端非编码区72 bp,3'端非编码区108 bp,开放阅读框426 bp,编码141个氨基酸,预测分子量15.6 kD,理论等电点9.55.同源性分析表明,三疣梭子蟹CCAP与拟穴青蟹(Scylla paramamosain)和蓝蟹(Callinectes sapidus)的CCAP同源性较高,分别为85％和82％.系统进化树分析显示,三疣梭子蟹与蓝蟹首先聚为一支,之后再与拟穴青蟹相聚.组织表达分析发现,CCAP基因在胸神经节中的相对表达量最高,其次是脑和眼柄组织.通过分析CCAP基因在低盐胁迫过程中的表达规律发现,低盐可显著改变CCAP在胸神经节中的表达模式,在24 h,48 h和72 h实验组的表达量显著高于对照组(P<0.05),分别为对照组的1.73,2.16和2.19倍.体外注射CCAP多肽可降低三疣梭子蟹在低盐条件下的死亡率,并诱发钠钾ATP酶(Na+/K+-ATPase)和V型ATP酶(V-ATPase)酶活力显著提高.本实验结果暗示CCAP通过调控Na+/K+-ATPase和V-ATPase活力以达到盐度适应的作用.