三疣梭子蟹PtDNMT1基因的克隆及其在低盐适应中的表达分析

• 作者: 刘萍 吕建建 孙东方 环朋朋 高保全
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 三疣梭子蟹 PtDNMT1 盐度胁迫 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 92-100
• 页数: 9页
• 分类号: S917
• 字数: 5262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20171201001

摘要

甲基转移酶是维持基因组甲基化状态的重要基因,本研究利用SMART-RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)甲基转移酶基因(PtDNMTl).PtDNMT1基因cDNA序列全长5919 bp,包括4832 bp的开放阅读框,编码1610个氨基酸,预测分子量为148.15kDa,理论等电点为4.68.结构预测发现,PtDNMT1有2个特殊的结构域,分别是锌指结构域(zf-CXXC)和甲基转移酶家族特有的Dcm结构域.进化树分析显示,PtDNMT1基因与昆虫类的DNMT基因聚为一支.组织表达分析发现,PtDNMT1基因在肝胰腺、鳃、卵巢、肌肉、胃、心脏、血液中均有表达,其中在肝胰腺中表达最高,卵巢和鳃次之.进一步研究了低盐胁迫后PtDNMT1基因在鳃、肝胰腺和肌肉组织中的表达变化规律为胁迫6h时鳃组织中PtDNMT1基因的表达即达到峰值(5.3倍),并一直持续到12 h(4倍),随后逐步下降,在72 h时仍显著高于对照组(2.3倍);PtDNMT1基因在肝胰腺中的表达规律类似于鳃,然而其达到峰值的时间稍晚于鳃(24h),且上调倍数高于鳃(8倍);低盐胁迫后PtDNMT1基因在肌肉中的表达最初呈现下调趋势,之后(24 h)上调表达至峰值(2.2倍),且一直上调表达至72 h.本研究首次克隆了PtDNMT1基因,根据其在各组织中的表达分布特征以及盐度胁迫后的表达变化情况,推测DNA甲基化在三疣梭子蟹低盐适应中发挥了重要作用.