荧光原位杂交在布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌检测中的应用

• 作者: 孙世雄 孙明军 孙翔翔 张喜悦 王萍 魏荣
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 荧光原位杂交 布鲁氏菌 牛结核分枝杆菌 人兽共患病
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61
• 字数: 3080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.09.016

摘要

荧光原位杂交技术可快速鉴定病原菌,较传统病原分离鉴定方法具有明显优势.针对我国动物布鲁氏菌病和牛结核病这两个重要的人兽共患病,目前还没有标准的荧光原位杂交检测方法可供参考.为建立布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌荧光原位杂交检测方法,快速诊断动物布鲁氏菌病和牛结核病,利用布鲁氏菌探针Bru-996和结核分枝杆菌探针MTB770,通过优化杂交温度、杂交时间和样品处理等关键条件,确定最佳检测程序;根据已知背景的菌株和临床样品,对Bru-996和MTB770探针的特异性和敏感性进行评价,最终建立了荧光复位杂交诊断方法.结果显示:反应条件优化后,该方法可在4 h内完成布鲁氏菌检测;荧光标记Bru-996探针与布鲁氏菌待检菌株的杂交结果均为阳性,而与结核分枝杆菌、禽结核分枝杆菌和大肠杆菌杂交结果均为阴性,并从5个已知背景的组织病料中成功检出布鲁氏菌.牛结核分枝杆菌检测则需要6～8 h,杂交前必须对样品用二甲苯和溶菌酶进行处理;MTB770探针可特异性识别并能从牛肺部结节中检出牛结核分枝杆菌.结果表明,荧光原位杂交方法快速、简便,而且Bru-996和MTB770探针分别在布鲁氏菌和牛结核分枝杆菌检测上具有较高的特异性,可替代传统的病原分离鉴定,作为动物布鲁氏菌病和牛结核病的实验室确诊方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏荣		40	237	9.0	13.0
2	张喜悦		20	126	7.0	10.0
3	孙翔翔		9	15	2.0	3.0
4	孙世雄		3	0	0.0	0.0
5	孙明军		6	14	2.0	3.0
6	王萍		3	0	0.0	0.0