融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤BJAB细胞杀伤作用及其机制研究

• 作者: 刘红芹 周珊 姜琳琳 屈浩 杨圆圆 杨铭 熊冬生 石釧 范冬梅 陶欣勇 韩博文
• 来源期刊: 中国肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 基因工程抗体 融合蛋白 力达霉素 B细胞淋巴瘤 细胞周期
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 220-226
• 页数: 7页
• 分类号: R733.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11735/j.issn.1004-0242.2019.03.A011

摘要

[目的]探讨融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对B细胞淋巴瘤细胞株BJAB细胞的杀伤作用及其机制研究.[方法]利用流式细胞分析技术(FACS)和激光共聚焦显微镜技术,检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM与BJAB细胞的结合活性.MTT法检测融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞的体外杀伤活性.彗星电泳实验检测融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM对BJAB细胞DNA的损伤.FACS检测不同浓度融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM处理BJAB细胞后细胞周期的变化.[结果] FACS和激光共聚焦显微镜技术实验结果表明,融合蛋白anti-CD 19(Fab)-LDM能与BJAB细胞结合.MTT法实验结果表明,融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM对BJAB细胞杀伤活性较单用力达霉素或阿霉素强,IC50值分别为(0.15±0.02)nmol/L、(0.38±0.03)nmol/L和(57.15±2.30)nmol/L.彗星电泳实验结果表明,用5pmol/L的融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM及力达霉素处理BJAB细胞后,可引起细胞不同程度的DNA损伤,由于融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM具有靶向性和细胞内化的特性,对DNA造成的损伤较力达霉素组明显.FACS结果显示,随着融合蛋白anti-CD19(Fab)-LDM浓度的增加,S期的比例从53.78％升高至77.29％,呈剂量依赖性.[结论]融合蛋白anti-CD19 (Fab)-LDM可以靶向杀伤B细胞淋巴瘤细胞株BJAB,引起细胞周期阻滞,在B细胞淋巴瘤生物治疗中具有潜在的应用价值.