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嵌合人偏肺病毒表位的重组流感病毒毒株的构建
嵌合人偏肺病毒表位的重组流感病毒毒株的构建
作者:
Lin Yipu
孔梅
李晓燕
苏旭
邹明
郭丽茹
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
人偏肺病毒
流感病毒载体
病毒拯救
抗原表位
摘要:
目的 构建和拯救重组嵌合表达人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)表位的流感病毒株.方法 将通过生物信息学软件预测的hMPV B细胞表位、CTL表位和Th表位串联为不同表位组合,将其表位蛋白基因分别插入A/PR/8/34(PR8)流感病毒非结构蛋白NS1基因,利用8质粒系统共转染293T/MDCK细胞,拯救重组流感病毒毒株,全基因组测序鉴定重组流感病毒.同时测定重组病毒的血凝素(HA)活性和半数细胞感染量(TCID50)及生长曲线.结果 在hMPV不同表位间引入间隔序列GPGPG和KK,构建串联多表位抗原,将该抗原基因插入PR8流感病毒非结构蛋白NS基因,经反向遗传学成功拯救出3株重组流感病毒毒株.经MDCK细胞传代3次,鸡胚传代1次,3株重组流感病毒毒株增殖稳定.流感病毒全基因组测序证实,重组的3株流感病毒毒株分别嵌入了hMPV的B细胞表位、CTL表位/Th细胞表位和B细胞表位/Th细胞表位,命名为rFLU/hMPV/B、rFLU/hMPV/CTL-Th、rFLU/hMPV/B-Th.HA滴度分别为128、128、256,TCID50分别为107.0/ml、106.8/ml和107.0/ml.生长曲线试验结果表明重组流感病毒毒株可在MDCK细胞中有效复制.结论 成功拯救出3株嵌合有hMPV B细胞表位、CTL表位/Th细胞表位和B细胞表位/Th细胞表位的重组流感病毒株,为后续评价该重组病毒株的免疫效果及是否有潜在疫苗应用价值提供实验资料.
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篇名
嵌合人偏肺病毒表位的重组流感病毒毒株的构建
来源期刊
中华微生物学和免疫学杂志
学科
关键词
人偏肺病毒
流感病毒载体
病毒拯救
抗原表位
年,卷(期)
2019,(1)
所属期刊栏目
病毒学
研究方向
页码范围
6-11
页数
6页
分类号
字数
5144字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2019.01.002
五维指标
作者信息
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苏旭
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孔梅
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李晓燕
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流感病毒载体
病毒拯救
抗原表位
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中华微生物学和免疫学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0254-5101
CN:
11-2309/R
开本:
大16开
出版地:
北京市经济技术开发区经海二路38号
邮发代号:
2-55
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
5865
总下载数(次)
10
总被引数(次)
26456
相关基金
中国博士后科学基金
英文译名:
China Postdoctoral Science Foundation
官方网址:
http://www.chinapostdoctor.org.cn/index.asp
项目类型:
学科类型:
期刊文献
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