布鲁氏菌eryA基因的克隆、原核表达及生物信息学分析

• 作者: 乌东高娃 关平原 宋前进 李伊铭 杭天宇 温永俊
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏菌 eryA基因 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 61-67,84
• 页数: 8页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4153字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2019.05.012

摘要

为分析羊种布鲁氏菌Rev.I株的基因结构、功能及作为诊断抗原的可能性,从Rev.I株基因组中扩增eryA基因片段,构建重组质粒pET-30a-eryA并进行原核表达、Western-blot检测,同时对该基因进行生物信息学分析.结果 显示:本试验成功克隆并表达了eryA基因;经Western-blot检测发现,该基因编码蛋白可与阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性;生物信息学分析显示,该蛋白没有跨膜区结构,无信号肽,二级结构中α-螺旋比重最大;抗原表位分析显示:该蛋白含有较多的抗原决定簇.因此,推测eryA蛋白有望作为布鲁氏菌的免疫诊断抗原,这为进一步探索布鲁氏菌基因工程疫苗的研制及iELISA诊断试剂盒的建立奠定了基础.