结核分枝杆菌KatG-ACT271CCT(Thr271Pro)突变与异烟肼耐药关系的研究

• 作者: 刘惟优 吴龙火 杨寿慧 袁小亮
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 katG基因 异烟肼 耐药性
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 结核专题
• 页码范围: 487-492,497
• 页数: 7页
• 分类号: R378.91
• 字数: 5268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.018

摘要

目的 探讨结核分枝杆菌katG ACT271CCT(Thr271Pro)基因点突变对异烟肼耐药性的影响.方法 应用基因克隆技术合成野生型katG、突变型katG(AGC315ACC)和katG(ACT271CCT)基因片段,分别重组至质粒pET22b(+),转入表达菌BL21(DE3) pLySs,IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法对目的蛋白分离纯化.最终检测重组katG蛋白过氧化物酶及过氧化氢酶活性.此外,通过软件AutoDock4.0采用半柔性对接方式分别模拟野生型katG蛋白、Thr271Pro突变型katG蛋白与异烟肼相互作用.结果 成功获得纯化katG重组蛋白.相比野生型katG蛋白(过氧化氢酶活性361.5 U/mg和过氧化物酶活性77.6 U/mg),Th r271 Pro突变型katG蛋白过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降56％和63％(158.8 U/mg和28.7 U/mg),而Ser315Thr突变型katG蛋白过氧化氢酶和过氧化物酶活性分别下降74％和75％(96.2 U/mg和19.7 U/mg).分子对接结果提示,异烟肼与Thr271Pro突变型katG蛋白结合自由能较野生型升高,Thr271 Pro突变蛋白与异烟肼结合的亲和性降低.271位氨基酸突变后,Thr271Pro突变型katG蛋白氧化反应活性空腔发生一定的变形.结论 katGThr271 Pro基因突变引起katG蛋白酶活性部分缺失和氧化反应活性空腔发生变形,导致异烟肼耐药.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘惟优	赣南医学院第一附属医院呼吸科	62	171	6.0	11.0
2	吴龙火	赣南医学院药学院	43	160	8.0	11.0
3	袁小亮	赣南医学院第一附属医院呼吸科	15	21	3.0	4.0
4	杨寿慧		4	2	1.0	1.0