抗金黄色葡萄球菌 α-溶血素全人源单链抗体的筛选及初步鉴定

• 作者: 于红 吴桐 李春 李雪 秦大莲 袁青 谢翔
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α-HL 全人源单链抗体 噬菌体展示 筛选
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1100-1104
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.09.015

摘要

目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌 α-溶血素(α-HL)单链抗体.方法:IPTG低温诱导 α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗 α-HL全人源单链抗体(scFv).将筛选并测序鉴定正确的15株scFvs插入pLZ16载体进行表达验证和ELISA鉴定.结果:表达纯化的 α-HL融合蛋白为可溶性蛋白,大小约为90 kD.采用表达的 α-HL融合蛋白作为抗原,经过4轮噬菌体展示筛选,ELISA结果显示大约有34％ 的scFvs与α-HL具有结合特性.将与 α-HL结合良好且序列正确的15株scFvs插入pLZ16载体中进行可溶性表达后,经Western blot验证正确;ELISA鉴定结果显示:scFvs与购买的 α-HL(Sigma,USA)、金黄色葡萄球菌都具有较高的结合活性且对金黄色葡萄球菌特异,与白色葡萄球菌无交叉反应.结论:成功筛选到抗 α-HL全人源单链抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雪	西南医科大学基础医学院	11	7	2.0	2.0
2	袁青	西南医科大学基础医学院	4	0	0.0	0.0
3	李春	西南医科大学药学院药理学系	1	0	0.0	0.0
4	吴桐	西南医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0
5	秦大莲	西南医科大学药学院药理学系	6	10	1.0	3.0
6	于红	西南医科大学基础医学院	3	1	1.0	1.0
7	谢翔	西南医科大学基础医学院	1	0	0.0	0.0