水痘-带状疱疹病毒主要衣壳蛋白ORF40单克隆抗体的制备及初步应用

• 作者: 付文锟 叶江辉 夏宁邵 朱桦 潘德全 王玮 程通 蔡琳俐
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 水痘-带状疱疹病毒 主要衣壳蛋白 ORF40 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1095-1099
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12|R511.5
• 字数: 4734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.09.014

摘要

目的:制备抗水痘-带状疱疹病毒(VZV)主要衣壳蛋白ORF40的单克隆抗体,对该蛋白在VZV感染细胞内的表达、分布以及在VZV病毒颗粒中的包含情况进行初步探究.方法:设计并合成VZV ORF40多肽片段,偶联牛血清白蛋白后免疫小鼠,制备与筛选抗VZV ORF40单克隆抗体,使用获得的抗体通过Western blot和免疫荧光法对VZV感染细胞进行检测,并通过Western blot对纯化的VZV病毒颗粒进行检测.结果:获得VZV ORF40单克隆抗体10F2,该抗体可特异性识别VZV感染细胞表达的以及VZV病毒颗粒包含的ORF40蛋白;本研究应用该抗体确定了ORF40蛋白在VZV感染细胞中的核定位,并且发现ORF40蛋白在核周有点状聚集现象,在细胞质区域偶尔也能检测到ORF40蛋白的分布.结论:本研究筛选获得抗VZV ORF40的特异性单克隆抗体,为后续开展该蛋白在VZV感染与病毒颗粒组装过程中的功能研究奠定基础.