抗人CLC-7多克隆抗体的制备

• 作者: 徐勇 王瑶 袁园 赵文然 赵朔暄
• 来源期刊: 国际免疫学杂志
• 关键词: 氯离子通道蛋白7 抗体
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 127-130
• 页数: 4页
• 字数: 3137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4394.2019.02.003

摘要

目的 制备抗氯离子通道蛋白(chloride channel 7,CLC-7)多克隆抗体.方法 将表达载体pEGFP-CLC-7导入感受态大肠杆菌DH-5α,利用异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalacto-side,IPTG)诱导细菌表达CLC-7蛋白;经SDS-PAGE电泳后切胶获得纯化的CLC-7蛋白,与免疫佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,免疫5次后,经心脏采血获取抗血清,用Western blot检测抗血清特异性及效价.结果 与市售的CLC-7抗体比较,所获抗CLC-7抗血清可识别细菌及HeLa细胞表达的CLC-7蛋白,表明抗血清有较好的特异性;1:4000倍稀释抗血清时,Western blot实验仍可获得清晰的反应带,表明所制备的抗CLC-7多克隆抗体有较高的效价.结论 利用原核表达的CLC-7蛋白作为抗原免疫动物,获得了高效价且特异性好的抗人CLC-7蛋白多克隆抗体,该抗体可用于后续研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑶	哈尔滨医科大学细胞生物学教研室	24	71	5.0	7.0
2	徐勇	哈尔滨医科大学细胞生物学教研室	5	15	1.0	3.0
3	赵文然	哈尔滨医科大学细胞生物学教研室	16	61	3.0	7.0
4	袁园	哈尔滨医科大学细胞生物学教研室	2	0	0.0	0.0
5	赵朔暄	哈尔滨医科大学细胞生物学教研室	2	1	1.0	1.0