一种高效慢病毒转染小鼠肺方法的建立

• 作者: 付秋霞 王东根 王晓英 王玥 王蕾 詹林盛
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒属 转染 高压喷雾注射 绿色荧光蛋白质类 萤光素酶类 肺 活体成像系统
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 616-619
• 页数: 4页
• 分类号: R373|R655.3
• 字数: 4266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2019.08.013

摘要

目的 建立一种高效慢病毒转染小鼠肺的方法.方法 采用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和萤光素酶(luciferase,Luc)双基因标记慢病毒载体,通过293 FT细胞体外包装带有报告基因的慢病毒颗粒.选取BALB/c小鼠30只,每组15只,随机分为高压喷雾注射组和普通注射组,小鼠手术暴露气管,经气道注射报告基因标记的慢病毒颗粒,观察慢病毒转染至肺后2、4、6、8、10、12h小鼠存活率和呼吸系统表现,并在转染后24 h体外活体荧光成像仪检测报告基因在小鼠体内的发光强度.结果 荧光显微镜下观察,见多数细胞表达GFP,并见细胞融合现象,少量细胞悬浮,病毒滴度为5×107U/ml.活体荧光成像结果显示,与普通注射方法相比,高压喷雾注射组报告基因荧光强度均匀分布在肺中,荧光强度较高,两组间表达强度比较差异有统计学意义(P=0.0095);且高压喷雾注射组小鼠气促、鼻唇黏膜发绀(cyanosis)较普通注射组恢复快,两组12h存活率分别为80％和50％.结论 高压喷雾注射技术转染慢病毒颗粒至小鼠肺的技术更为高效,可用于建立外源基因小鼠肺转染模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹林盛	军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所	3	0	0.0	0.0
2	王晓英	解放军总医院第六医学中心内分泌科	2	0	0.0	0.0
3	王蕾	军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所	3	0	0.0	0.0
4	付秋霞	军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所	2	0	0.0	0.0
5	王玥	军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所	1	0	0.0	0.0
9	王东根	军事科学院军事医学研究院卫生勤务与血液研究所	1	0	0.0	0.0