应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积的研究

• 作者: 吕聪 孙麟 宋君来 李圆 李满 贺亚军 马迅
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 活细胞工作站 细胞体积 损伤 水肿 水通道蛋白4
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 356-363
• 页数: 8页
• 分类号: R-331
• 字数: 6303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2019.04.10

摘要

目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果.方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养.将第4代成熟的星形胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧处理,并分为4组:A组(不做糖氧剥夺及复氧处理),B组(糖氧剥夺6h,复氧12h),C组(糖氧剥夺6h,复氧24h),D组(糖氧剥夺6h,复氧48h).通过活细胞工作站扫描检测计算各组细胞的体积,利用光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构变化,通过Western blot测定其水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达变化来进一步验证活细胞工作站测量细胞体积的准确性.结果:利用活细胞工作站检测体积,与A组细胞2810.19±306.11 μm3相比,B组细胞体积4311.53±407.73μm3明显高于A组(P＜0.01),C组细胞体积6248.86 ±702.11 μm3为到最大值,D组细胞体积4541.33±503.17μm3,细胞体积较C组有所下降,但仍明显高于A组,差异有统计学意义(P＜0.01).光镜下观察细胞B组出现肿胀、折光性增强,C组细胞水肿达到高峰,D组水肿虽有缓解,但仍很明显;透射电镜下观察B组可见细胞器开始肿胀,C组细胞肿胀更加明显,出现线粒体嵴发生断裂等表现,D组水肿稍有缓解,但仍很明显.Western blot结果显示,A组细胞AQP4蛋白表达为(12.37±0.85)％,B组细胞AQP4蛋白表达为(34.17±2.07)％,C组细胞AQP4蛋白表达(43.57±1.75)％,D组细胞AQP4蛋白表达(32.26±1.37)％,与A组细胞相比,B组、C组、D组明显高于A组(P＜0.01),与C组细胞相比,B组、D组明显低于C组(P＜0.01).结论:活细胞工作站能较为准确地检测大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积,可作为一种常规的检测手段运用于星形胶质细胞体积测量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马迅	山西医科大学附属大医院骨科	111	600	12.0	20.0
2	李圆	山西医科大学基础医学院	6	40	3.0	6.0
3	李满	山西医科大学第二医院神经内科	11	30	3.0	5.0
4	孙麟	山西医科大学附属大医院骨科	9	24	3.0	4.0
5	宋君来	山西医科大学附属大医院骨科	2	2	1.0	1.0
6	吕聪	山西医科大学附属大医院骨科	5	9	2.0	2.0
7	贺亚军	山西医科大学附属大医院骨科	3	5	2.0	2.0