肠道轮状病毒巢式PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 刘爱玲 刘爱胜 吴敏 罗小芳
• 来源期刊: 临床输血与检验
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道轮状病毒 巢式PCR 建立 应用
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 临床检验
• 页码范围: 604-608
• 页数: 5页
• 分类号: R373.2|R392.11
• 字数: 3045字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2019.06.013

摘要

目的 建立一种特异性和灵敏度高的检测婴幼儿腹泻粪便标本中肠道轮状病毒(RV)的巢式PCR方法 ,并探讨其在临床诊断中的初步应用价值.方法根据RV保守区基因序列并利用Primer5.0软件设计巢式PCR两对引物,建立一种特异性和灵敏度高的检测RV的巢式PCR方法,并评价其特异度和敏感度.同时采用所建立的巢式PCR法对136份临床样品进行检测,并用单一的RT-PCR法、胶体金和基因序列法进行结果 验证.结果巢式PCR法只扩增检测出192 bp的RV特异性条带,对其他肠道病毒均呈阴性反应,特异性好;巢式PCR法最低能检测到8.705 fg/μL的RV;巢式PCR法与单一的RT-PCR法检测结果符合率为100％,但灵敏度低于胶体金法,差异有统计学意义(χ2=2.615,P<0.05);将巢式PCR法扩增的RV产物进行核苷酸正反向测序,经BLAST比对,RV与EU679386、DQ870492、AF531912等20多株已知序列的同源性为98％～100％.结论 建立了检测肠道病毒RV的巢式PCR法,具有特异性强、灵敏度高,且检测快速,值得临床推广应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗小芳		7	65	5.0	7.0
2	吴敏	广东省深圳市龙华区人民医院检验科	24	43	3.0	5.0
3	刘爱玲	广东省深圳市龙华区人民医院检验科	7	18	2.0	4.0
4	刘爱胜	广东省深圳市龙华区人民医院检验科	9	73	5.0	8.0