鼠轮状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 孙竹筠 张泉 李泽君 林颖峥 熊炜 蔡骁垚 陈懿斐 陈鸿军 魏晓锋
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鼠轮状病毒 TaqMan 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 17-20
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.4
• 字数: 2713字
• 语种: 中文

摘要

根据鼠轮状病毒(Murine rotavirus,MRV)EB-C8/G16P毒株VP1基因(GenBank登录号:KJ477127.1),设计引物和TaqMan探针,确定标准曲线,建立MRV荧光定量PCR方法,检测其特异性、敏感性和稳定性.结果显示,建立的MRV荧光定量PCR方法标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99;最低可检测到10 copies/μL,是常规PCR的100倍;与常见的小鼠病毒株均无特异性扩增;批内和批间变异系数均小于2%,表明该方法重复性好.将建立的荧光定量PCR初步对246份小鼠肠道样品病料进行检测,结果均为阴性.本研究建立的MRV荧光定量PCR方法特异性、灵敏性良好,可为鼠轮状病毒的流行病学调查、检测以及制定国家标准和地方标准提供可靠的数据和适用的监测方法.