犬轮状病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 何丽 魏锁成
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 轮状病毒 VP7 RT-PCR 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 38-41
• 页数: 4页
• 分类号: S852.655
• 字数: 4495字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2009.05.016

摘要

目的:建立轮状病毒快速准确的检测方法,为研发诊断试剂盒和疫苗奠定基础.方法:用Primer 5软件设计VP7引物,从采集的腹泻犬粪便样品抽提病毒RNA,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,将RNA反转录为cDNA,并进行PCR扩增,对扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和测序,与代表株的VP7进行同源性比较.结果:从腹泻病犬粪便样品中抽提到了轮状病毒RNA,反转录后扩增产物为51bp的基因片段,经核苷酸序列分析,其PCR序列与犬轮状病毒VP7基因编码源序列的同源性为86.3%.结论:正确克隆了轮状病毒主要保护性抗VP7基因中抗原表位区,建立了犬轮状病毒实时定量诊断方法,为研制实时定量诊断试剂盒奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏锁成	西北民族大学动物医学研究所	95	356	10.0	14.0
2	何丽	西北民族大学动物医学研究所	6	11	3.0	3.0