猪A组轮状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 张彦明 曹伟伟 林鸷 王静 高婉俊
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: A组轮状病毒 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量PCR 猪
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 47-53
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.4|Q789
• 字数: 6077字
• 语种: 中文

摘要

本试验旨在建立一种检测猪A组轮状病毒的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法.参考GenBank上登录的猪轮状病毒OSU株的VP6基因序列保守区设计一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆目的基因,并将其连入pMD 19-T Vector,制备阳性标准品,优化反应条件.建立的方法在1.0×102～1.0×109拷贝/μL范围内线性关系良好,反应扩增效率大于90％,扩增相关系数大于0.98.对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪圆环病毒2型均检测不到荧光信号,表明该方法特异性强.该方法批内和批间变异系数均小于2％,重复性好.结果表明,建立的SYBR Green I实时荧光定量PCR方法可为A组猪轮状病毒早期感染的诊断及病毒定量分析提供技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张彦明	西北农林科技大学动物医学院	256	1530	16.0	24.0
2	王静	西北农林科技大学动物医学院	146	949	18.0	22.0
3	曹伟伟	西北农林科技大学动物医学院	5	25	3.0	5.0
4	高婉俊	西北农林科技大学动物医学院	1	7	1.0	1.0
5	林鸷	西北农林科技大学动物医学院	5	17	3.0	4.0