大鼠皮质神经元的体外培养及不同浓度尿激酶干预后的观察

• 作者: 冯肖亚 吕涌涛 徐林 葛汝村 陈平 魏巍
• 来源期刊: 神经损伤与功能重建
• 学科: 医学
• 关键词: 神经元 细胞培养 培养基 免疫荧光 尿激酶
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 271-274
• 页数: 4页
• 分类号: R741|R741.02|R743|R332
• 字数: 3457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16780/j.cnki.sjssgncj.2019.06.001

摘要

目的:建立科学简易的大鼠皮质神经元的体外培养方法,观察尿激酶对其干预后的表现.方法:取24 h内新生Wistar大鼠脑皮质,用浓度为2 mg/mL的木瓜酶和适量DNase I酶共同消化,并用配置好的无血清Neurobasal培养基接种培养,6 d后免疫荧光法鉴定神经元纯度;分别配置含尿激酶终浓度为5 000 U/mL、8 000 U/mL、10 000 U/mL、15 000 U/mL和20 000 U/mL的Neurobasal培养基并进行全量换液,镜下观察不同浓度尿激酶干预后神经元的变化.结果:培养6 d,神经元分化成熟,胞质丰富,树突及轴突舒展延长,可见密集的神经纤维网络,免疫荧光鉴定神经元纯度为88.2%;尿激酶干预后,发现尿激酶浓度在5 000~10 000 U/mL时,2 h内镜下观察培养体系无明显变化,但随时间的延长,尿激酶浓度为10 000 U/mL作用4 h时,可见少量神经元细胞破碎崩解,细胞间网状结构减少.尿激酶浓度在15 000 U/mL及20 000 U/mL时,干预2 h发现神经元细胞崩解,网状结构消失.结论:本实验建立了一种简易、高效的体外培养新生大鼠皮质神经元的方法,尿激酶浓度在5 000~10 000 U/mL时,2 h内对体外神经元培养体系是安全的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏巍	山东省立第三医院再生医学研究室	4	1	1.0	1.0
5	冯肖亚	山东省立第三医院神经内科	4	7	2.0	2.0
6	徐林	山东省立第三医院再生医学研究室	4	1	1.0	1.0
7	葛汝村	山东省立第三医院再生医学研究室	3	1	1.0	1.0
8	吕涌涛	山东省立第三医院再生医学研究室	4	15	2.0	3.0
12	陈平	山东省立第三医院再生医学研究室	1	0	0.0	0.0